- 王晓芸;葛建鸿;李泽康;江宛谕;王振余;袁约瑟;肖倩倩;蒋建军;孟庆贺;尚兰琴;郝卫东;魏雪涛;
目的 探究硝酸钇对成年雌性小鼠的免疫毒性。方法 100只雌性BALB/c小鼠随机分为5组，每组20只，分别灌胃硝酸钇溶液0、0.2、2.0、20.0和200.0 mg/kg·bw,每日1次，连续30 d。染毒结束后，各组随机选取10只小鼠，麻醉后处死，分离胸腺和脾称重并计算脏器系数，测定脾淋巴细胞增殖能力、脾NK细胞活性以及外周血、胸腺和脾主要免疫细胞表型。其余小鼠，用抗原生成细胞试验(PFC)和足跖增厚法(DTH)检测体液和细胞免疫功能。结果 200.0 mg/kg·bw组小鼠体重和脾脏系数低于对照组(P<0.05)。与对照组相比，0.2、2.0、20.0和200.0 mg/kg·bw组小鼠脾B细胞增殖能力降低(P<0.05)。200 mg/kg·bw组小鼠溶血空斑数目少于对照组(P<0.05)。免疫细胞病理学结果表示，与对照组相比，200 mg/kg·bw组小鼠外周血和脾B细胞比例降低(P<0.05),外周血中性粒细胞、Th细胞和NK细胞，脾T细胞、Th细胞、NK细胞和巨噬细胞，胸腺Th细胞比例均较对照组增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 经口摄入200.0 mg/kg·bw硝酸钇能抑制成年雌性小鼠脾B淋巴细胞增殖，降低外周血和脾B细胞比例，抑制体液免疫功能，产生明显的体液免疫毒性作用。脾是硝酸钇免疫毒性作用的敏感靶器官，脾B细胞增殖能力是其免疫毒性的敏感指标。
2022年01期 v.36 4-9+14页 [查看摘要][在线阅读][下载 1976K] - 王晓芸;葛建鸿;李泽康;江宛谕;王振余;袁约瑟;肖倩倩;蒋建军;孟庆贺;尚兰琴;郝卫东;魏雪涛;
目的 探究硝酸钇对成年雌性小鼠的免疫毒性。方法 100只雌性BALB/c小鼠随机分为5组，每组20只，分别灌胃硝酸钇溶液0、0.2、2.0、20.0和200.0 mg/kg·bw,每日1次，连续30 d。染毒结束后，各组随机选取10只小鼠，麻醉后处死，分离胸腺和脾称重并计算脏器系数，测定脾淋巴细胞增殖能力、脾NK细胞活性以及外周血、胸腺和脾主要免疫细胞表型。其余小鼠，用抗原生成细胞试验(PFC)和足跖增厚法(DTH)检测体液和细胞免疫功能。结果 200.0 mg/kg·bw组小鼠体重和脾脏系数低于对照组(P<0.05)。与对照组相比，0.2、2.0、20.0和200.0 mg/kg·bw组小鼠脾B细胞增殖能力降低(P<0.05)。200 mg/kg·bw组小鼠溶血空斑数目少于对照组(P<0.05)。免疫细胞病理学结果表示，与对照组相比，200 mg/kg·bw组小鼠外周血和脾B细胞比例降低(P<0.05),外周血中性粒细胞、Th细胞和NK细胞，脾T细胞、Th细胞、NK细胞和巨噬细胞，胸腺Th细胞比例均较对照组增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 经口摄入200.0 mg/kg·bw硝酸钇能抑制成年雌性小鼠脾B淋巴细胞增殖，降低外周血和脾B细胞比例，抑制体液免疫功能，产生明显的体液免疫毒性作用。脾是硝酸钇免疫毒性作用的敏感靶器官，脾B细胞增殖能力是其免疫毒性的敏感指标。
2022年01期 v.36 4-9+14页 [查看摘要][在线阅读][下载 1976K] - 王泽泽;陈晋波;刘君瑶;杨璟;李龙飞;孙鹤鸣;张一欣;郭会彩;
目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)对人源心肌AC16细胞DNA的损伤作用及其可能机制。方法 以人源心肌AC16细胞为研究对象，分为对照组，40、60、80、100和120μmol/L MEHP组。处理细胞24 h后采用DCFH-DA探针标记测定AC16细胞内活性氧(ROS)水平；单细胞凝胶电泳实验测定细胞DNA损伤情况；利用抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)抑制AC16细胞内ROS生成，以观察ROS在MEHP所致AC16细胞DNA损伤中的作用。结果 与对照组相比，AC16细胞经MEHP处理后，ROS水平随着MEHP浓度的增加而明显升高(P<0.05);对照组心肌细胞核呈圆形荧光团，强度均匀，边缘光滑，大小较一致，无明显拖尾。不同浓度MEHP处理后，各组心肌细胞出现彗星拖尾现象，且具有MEHP浓度依赖性。与对照组OTM值和TD值相比，MEHP组OTM值和TD值明显升高，且有统计学意义(P<0.05);预先给予NAC可明显降低MEHP所致的细胞ROS水平升高。与相应的MEHP组相比，NAC+MEHP组OTM值及TD值明显降低，且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MEHP可引起人源心肌AC16细胞DNA损伤，机制可能与ROS生成有关。
2022年01期 v.36 10-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 1574K] - 王泽泽;陈晋波;刘君瑶;杨璟;李龙飞;孙鹤鸣;张一欣;郭会彩;
目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)对人源心肌AC16细胞DNA的损伤作用及其可能机制。方法 以人源心肌AC16细胞为研究对象，分为对照组，40、60、80、100和120μmol/L MEHP组。处理细胞24 h后采用DCFH-DA探针标记测定AC16细胞内活性氧(ROS)水平；单细胞凝胶电泳实验测定细胞DNA损伤情况；利用抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)抑制AC16细胞内ROS生成，以观察ROS在MEHP所致AC16细胞DNA损伤中的作用。结果 与对照组相比，AC16细胞经MEHP处理后，ROS水平随着MEHP浓度的增加而明显升高(P<0.05);对照组心肌细胞核呈圆形荧光团，强度均匀，边缘光滑，大小较一致，无明显拖尾。不同浓度MEHP处理后，各组心肌细胞出现彗星拖尾现象，且具有MEHP浓度依赖性。与对照组OTM值和TD值相比，MEHP组OTM值和TD值明显升高，且有统计学意义(P<0.05);预先给予NAC可明显降低MEHP所致的细胞ROS水平升高。与相应的MEHP组相比，NAC+MEHP组OTM值及TD值明显降低，且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MEHP可引起人源心肌AC16细胞DNA损伤，机制可能与ROS生成有关。
2022年01期 v.36 10-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 1574K] - 王彦娜;李睿;张芬;周谡;冯超;薛黎明;徐加乐;邬春华;卢大胜;周志俊;
目的 探究氟咯草酮(Flurochloridone, FLC)暴露对C57BL/6小鼠血清脂质代谢的影响，进一步了解FLC的毒性作用及不良影响。方法 采用基于高效液相色谱串联高分辨质谱(HPLC-HRMS)的脂质组学技术分析C57BL/6小鼠染毒FLC后血清脂质代谢的变化。结果 375 mg/kg·bw FLC会引起小鼠血清脂质轮廓的改变。对每种脂质种类进行总相对丰度分析发现，FLC可引起溶血性磷脂和神经鞘磷脂明显变化，差异有统计学意义(P<0.05)。差异代谢物筛选发现FLC引起的脂质代谢紊乱涉及甘油磷脂、鞘磷脂和甘油酯等多个脂质代谢过程。结论 FLC具有脂毒性，染毒后会引起C57BL/6小鼠脂质代谢紊乱。
2022年01期 v.36 15-20+32页 [查看摘要][在线阅读][下载 1790K] - 王彦娜;李睿;张芬;周谡;冯超;薛黎明;徐加乐;邬春华;卢大胜;周志俊;
目的 探究氟咯草酮(Flurochloridone, FLC)暴露对C57BL/6小鼠血清脂质代谢的影响，进一步了解FLC的毒性作用及不良影响。方法 采用基于高效液相色谱串联高分辨质谱(HPLC-HRMS)的脂质组学技术分析C57BL/6小鼠染毒FLC后血清脂质代谢的变化。结果 375 mg/kg·bw FLC会引起小鼠血清脂质轮廓的改变。对每种脂质种类进行总相对丰度分析发现，FLC可引起溶血性磷脂和神经鞘磷脂明显变化，差异有统计学意义(P<0.05)。差异代谢物筛选发现FLC引起的脂质代谢紊乱涉及甘油磷脂、鞘磷脂和甘油酯等多个脂质代谢过程。结论 FLC具有脂毒性，染毒后会引起C57BL/6小鼠脂质代谢紊乱。
2022年01期 v.36 15-20+32页 [查看摘要][在线阅读][下载 1790K] - 葛建鸿;王晓芸;江宛谕;王振余;袁约瑟;肖倩倩;孟庆贺;蒋建军;郝卫东;魏雪涛;
目的 本研究拟评价硝酸铈对小鼠免疫功能以及免疫细胞病理学的影响。方法 将50只BALB/c小鼠随机分为对照组(超纯水)、0.2、2、20和200 mg/kg·bw硝酸铈剂量组，经30 d灌胃染毒后，测定小鼠NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖能力和免疫细胞病理学。结果 与对照组相比，200 mg/kg·bw硝酸铈能明显降低小鼠的体重和脾脏系数(P<0.01)。对于适应性免疫而言，在20 m/kg·bw组观察到了T细胞增殖能力的降低(P<0.05),以及肠系膜淋巴结中B淋巴细胞比例的明显降低(P<0.05);200 mg/kg·bw硝酸铈持续染毒30 d,能够明显抑制小鼠T细胞和B细胞的增殖能力(P<0.01),降低外周血、脾(P<0.05)和肠系膜淋巴结中B细胞的比例(P<0.01),降低外周血中总T细胞的比例(P<0.05);此外，200 mg/kg·bw小鼠胸腺T细胞亚型中的双阳性细胞的比例明显降低(P<0.05),同时Th细胞(P<0.01)和CTL细胞(P<0.05)的比例明显升高。在固有免疫中，在本研究剂量范围内均未能观察到NK细胞活性的改变(P>0.05)。流式结果提示200 mg/kg·bw硝酸铈能够引起小鼠外周血和脾中单核/巨噬细胞的比例以及肠系膜淋巴结中NK细胞比例的明显升高(P<0.05)。结论 硝酸铈经口暴露的免疫毒性较弱，200 mg/kg·bw剂量下能引起小鼠机体免疫系统紊乱，对固有免疫和适应性免疫均有影响。初步得出硝酸铈免疫毒性的LOEAL值为200 mg/kg·bw。
2022年01期 v.36 21-25+32页 [查看摘要][在线阅读][下载 1033K] - 葛建鸿;王晓芸;江宛谕;王振余;袁约瑟;肖倩倩;孟庆贺;蒋建军;郝卫东;魏雪涛;
目的 本研究拟评价硝酸铈对小鼠免疫功能以及免疫细胞病理学的影响。方法 将50只BALB/c小鼠随机分为对照组(超纯水)、0.2、2、20和200 mg/kg·bw硝酸铈剂量组，经30 d灌胃染毒后，测定小鼠NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖能力和免疫细胞病理学。结果 与对照组相比，200 mg/kg·bw硝酸铈能明显降低小鼠的体重和脾脏系数(P<0.01)。对于适应性免疫而言，在20 m/kg·bw组观察到了T细胞增殖能力的降低(P<0.05),以及肠系膜淋巴结中B淋巴细胞比例的明显降低(P<0.05);200 mg/kg·bw硝酸铈持续染毒30 d,能够明显抑制小鼠T细胞和B细胞的增殖能力(P<0.01),降低外周血、脾(P<0.05)和肠系膜淋巴结中B细胞的比例(P<0.01),降低外周血中总T细胞的比例(P<0.05);此外，200 mg/kg·bw小鼠胸腺T细胞亚型中的双阳性细胞的比例明显降低(P<0.05),同时Th细胞(P<0.01)和CTL细胞(P<0.05)的比例明显升高。在固有免疫中，在本研究剂量范围内均未能观察到NK细胞活性的改变(P>0.05)。流式结果提示200 mg/kg·bw硝酸铈能够引起小鼠外周血和脾中单核/巨噬细胞的比例以及肠系膜淋巴结中NK细胞比例的明显升高(P<0.05)。结论 硝酸铈经口暴露的免疫毒性较弱，200 mg/kg·bw剂量下能引起小鼠机体免疫系统紊乱，对固有免疫和适应性免疫均有影响。初步得出硝酸铈免疫毒性的LOEAL值为200 mg/kg·bw。
2022年01期 v.36 21-25+32页 [查看摘要][在线阅读][下载 1033K] - 李红侠;吴超;方雪梅;吴长昊;刘超;徐礼生;
目的 探讨全氟壬酸(PFNA)通过Bax/Bcl-2基因表达和线粒体途径诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制。方法 以不同剂量(0、25、50、100和200μmol/L)的PFNA作用人神经母细胞瘤细胞，CCK-8法检测细胞的存活率，激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧族含量和线粒体膜电位变化，荧光定量PCR仪检测细胞凋亡相关基因(Bax、Bcl-2和Caspase-3)的表达，酶标仪测定Caspase-3酶的活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率，DNA琼脂糖电泳法观察细胞DNA损伤片段。结果 PFNA的浓度为50μmol/L开始，细胞的存活率与对照比较明显下降，差异有统计学意义(P<0.05),随着PFNA浓度的增加，活性氧含量逐渐升高，线粒体膜电位逐渐下降，Bax、Caspase-3表达水平较对照升高(P<0.05),Bcl-2表达水平较对照低，Bax/Bcl-2、Caspase-3酶的活性较对照升高(P<0.05),出现DNA凋亡条带，凋亡率增加，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PFNA可导致人神经母细胞凋亡，与其促进活性氧簇生成、降低线粒体膜电位，促凋亡基因Bax、Caspase-3表达增加，抑凋亡基因表达降低，Caspase-3活性增强有关。
2022年01期 v.36 26-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 2033K] - 李红侠;吴超;方雪梅;吴长昊;刘超;徐礼生;
目的 探讨全氟壬酸(PFNA)通过Bax/Bcl-2基因表达和线粒体途径诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的机制。方法 以不同剂量(0、25、50、100和200μmol/L)的PFNA作用人神经母细胞瘤细胞，CCK-8法检测细胞的存活率，激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧族含量和线粒体膜电位变化，荧光定量PCR仪检测细胞凋亡相关基因(Bax、Bcl-2和Caspase-3)的表达，酶标仪测定Caspase-3酶的活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率，DNA琼脂糖电泳法观察细胞DNA损伤片段。结果 PFNA的浓度为50μmol/L开始，细胞的存活率与对照比较明显下降，差异有统计学意义(P<0.05),随着PFNA浓度的增加，活性氧含量逐渐升高，线粒体膜电位逐渐下降，Bax、Caspase-3表达水平较对照升高(P<0.05),Bcl-2表达水平较对照低，Bax/Bcl-2、Caspase-3酶的活性较对照升高(P<0.05),出现DNA凋亡条带，凋亡率增加，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PFNA可导致人神经母细胞凋亡，与其促进活性氧簇生成、降低线粒体膜电位，促凋亡基因Bax、Caspase-3表达增加，抑凋亡基因表达降低，Caspase-3活性增强有关。
2022年01期 v.36 26-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 2033K]
- 陈艳;雷毅;张晨;徐漪;李旭峰;
目的 对DNMT1高表达食管上皮细胞相关LncRNA进行初步筛选和鉴定，为揭示疾病发病机制提供基础。方法 通过Agilent Human LncRNA V5芯片检测DNMT1高表达细胞和正常人食管上皮细胞差异表达的LncRNA和mRNA(差异倍数≥2.0,P<0.05)。选取10种差异较大的LncRNA进行qRT-PCR验证。KEGG通路分析和GO功能注释分析差异表达的mRNA。经过KEEG分析后选取4条信号通路进行LncRNA-mRNA共表达网络分析。结果 共筛选出6 987个差异表达的LncRNA和7 421个差异表达的mRNA。qRT-PCR验证筛选出的10个LncRNA,全部与芯片结果吻合。GO及Pathway显示差异表达的LncRNA和mRNA分别参与凝血、细胞外间隙和蛋白结合等生物学功能。LncRNA-mRNA共表达分析得到了参与p53信号通路、幽门螺旋杆菌感染的上皮细胞信号转导、PI3K-Akt信号通路以及自然杀伤细胞介导的细胞毒性的LncRNA。结论 通过芯片分析发现了DNMT1高表达细胞和正常食管上皮细胞中LncRNA和mRNA的差异表达谱。差异表达的LncRNA和mRNA在p53、PI3K-Akt等信号通路中存在复杂的调控作用。
2022年01期 v.36 33-37+42页 [查看摘要][在线阅读][下载 1840K] - 陈艳;雷毅;张晨;徐漪;李旭峰;
目的 对DNMT1高表达食管上皮细胞相关LncRNA进行初步筛选和鉴定，为揭示疾病发病机制提供基础。方法 通过Agilent Human LncRNA V5芯片检测DNMT1高表达细胞和正常人食管上皮细胞差异表达的LncRNA和mRNA(差异倍数≥2.0,P<0.05)。选取10种差异较大的LncRNA进行qRT-PCR验证。KEGG通路分析和GO功能注释分析差异表达的mRNA。经过KEEG分析后选取4条信号通路进行LncRNA-mRNA共表达网络分析。结果 共筛选出6 987个差异表达的LncRNA和7 421个差异表达的mRNA。qRT-PCR验证筛选出的10个LncRNA,全部与芯片结果吻合。GO及Pathway显示差异表达的LncRNA和mRNA分别参与凝血、细胞外间隙和蛋白结合等生物学功能。LncRNA-mRNA共表达分析得到了参与p53信号通路、幽门螺旋杆菌感染的上皮细胞信号转导、PI3K-Akt信号通路以及自然杀伤细胞介导的细胞毒性的LncRNA。结论 通过芯片分析发现了DNMT1高表达细胞和正常食管上皮细胞中LncRNA和mRNA的差异表达谱。差异表达的LncRNA和mRNA在p53、PI3K-Akt等信号通路中存在复杂的调控作用。
2022年01期 v.36 33-37+42页 [查看摘要][在线阅读][下载 1840K] - 尹锦瑶;周倩;谭婧文;蒋成兰;李舒婷;何越峰;
目的 探讨无机砷及其主要代谢产物对A549细胞中的Bax和Bak基因表达的影响。方法 以不同浓度(0、20、40和60μmol/L)亚砷酸钠(NaAsO_2)和60μmol/L一甲基胂酸(methylarsonicacid, MMA)、60μmol/L二甲基胂酸(dimethylarsenate, DMA)染毒A549细胞48 h,采用凋亡与坏死细胞绿色荧光探针和C1056细胞凋亡与坏死检测试剂盒双重染色，倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡和坏死情况，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bax和Bak的蛋白表达情况，荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测Bax和Bak的mRNA表达情况。结果 观察细胞凋亡与坏死情况，同对照组比较，各NaAsO_2染毒组凋亡和坏死增加，且随剂量增加，凋亡和坏死增加。Western blot结果显示，同对照组相比，不同浓度的NaAsO_2染毒组Bax和Bak的蛋白表达量均升高(P<0.01),且NaAsO_2与Bax、Bak蛋白表达量之间存在明显剂量反应关系；MMA和DMA均可使Bax的蛋白表达量增加，但MMA和DMA可使Bak蛋白表达降低。QRT-PCR结果显示，各NaAsO_2染毒组Bax和Bak的mRNA表达同对照组相比明显升高(P<0.05);MMA可促进Bax的mRNA表达(P<0.05),但DMA对Bax的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);MMA和DMA对Bak的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NaAsO_2促进A549细胞中Bax和Bak基因蛋白的表达，但其主要代谢产物对Bax和Bak的影响与NaAsO_2相比存在差异。
2022年01期 v.36 38-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 1043K] - 尹锦瑶;周倩;谭婧文;蒋成兰;李舒婷;何越峰;
目的 探讨无机砷及其主要代谢产物对A549细胞中的Bax和Bak基因表达的影响。方法 以不同浓度(0、20、40和60μmol/L)亚砷酸钠(NaAsO_2)和60μmol/L一甲基胂酸(methylarsonicacid, MMA)、60μmol/L二甲基胂酸(dimethylarsenate, DMA)染毒A549细胞48 h,采用凋亡与坏死细胞绿色荧光探针和C1056细胞凋亡与坏死检测试剂盒双重染色，倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡和坏死情况，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bax和Bak的蛋白表达情况，荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测Bax和Bak的mRNA表达情况。结果 观察细胞凋亡与坏死情况，同对照组比较，各NaAsO_2染毒组凋亡和坏死增加，且随剂量增加，凋亡和坏死增加。Western blot结果显示，同对照组相比，不同浓度的NaAsO_2染毒组Bax和Bak的蛋白表达量均升高(P<0.01),且NaAsO_2与Bax、Bak蛋白表达量之间存在明显剂量反应关系；MMA和DMA均可使Bax的蛋白表达量增加，但MMA和DMA可使Bak蛋白表达降低。QRT-PCR结果显示，各NaAsO_2染毒组Bax和Bak的mRNA表达同对照组相比明显升高(P<0.05);MMA可促进Bax的mRNA表达(P<0.05),但DMA对Bax的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);MMA和DMA对Bak的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NaAsO_2促进A549细胞中Bax和Bak基因蛋白的表达，但其主要代谢产物对Bax和Bak的影响与NaAsO_2相比存在差异。
2022年01期 v.36 38-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 1043K] - 谢静华;闫九明;程树品;杨溢;王贺;陈锦瑶;张立实;
目的 探讨围生期低剂量4-壬基酚(4-NP)暴露对亲代雌性Wistar大鼠的免疫毒性及相关作用机制。方法 按照受孕时体重将母鼠分为空白对照组和低、中和高剂量组，从妊娠(GD)第6天至产后(PND)第21天分别给予正常和4-壬基酚拌饲量依次为10、100和500 mg/kg的NIH-31改良饲料。PND21后，将母鼠随机分为两部分：一部分进行空斑实验和血清凝血素测定；另一部分进行NK细胞活性测定和脾淋巴细胞转化试验，并测定血清细胞因子含量。此外，每组随机抽取3只母鼠测量外周血和脾淋巴细胞亚群以及脾中叉头状转录因子3(Foxp3)和孤独核受体γt(RORγt)mRNA表达量、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子5(p-STAT5)和磷酸化酪氨酸激酶3(p-JAK3)的蛋白水平。结果 与空白组相比，高剂量组GD21和GD22母鼠体重明显降低(P<0.01),高剂量组PND4、PND7、PND11体重明显低于空白组(P<0.05);胸腺和脾高剂量组脏器系数明显低于空白组(P<0.05);高剂量组血清凝集程度和空斑数明显低于空白组(P<0.05),同时3个剂量组的NK细胞活性均明显降低(P<0.05);外周血中高剂量组B细胞占白细胞的比例高于空白组(P<0.05),外周血和脾中、高剂量组辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比值均明显高于空白组(P<0.01);与空白组相比，高剂量组血清转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-17A(IL-17A)含量及3个剂量组血清白细胞介素-10(IL-10)含量、TGF-β/IL-17A比值均明显降低(P<0.05);各剂量组脾Foxp3/RORγt mRNA比值均低于空白组(P<0.05);低和中剂量组脾p-STAT3、p-STAT5及高剂量组p-JAK3蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 围生期低剂量4-壬基酚暴露对亲代雌性大鼠具有一定的免疫毒性，其可能机制与4-NP可通过激活JAK-STAT信号通路，导致p-STAT3和p-STAT5持续激活，诱导RORγt表达，促进Th17细胞分化和IL-17的释放，使Th17/Treg平衡左移有关。
2022年01期 v.36 43-48+54页 [查看摘要][在线阅读][下载 1398K] - 谢静华;闫九明;程树品;杨溢;王贺;陈锦瑶;张立实;
目的 探讨围生期低剂量4-壬基酚(4-NP)暴露对亲代雌性Wistar大鼠的免疫毒性及相关作用机制。方法 按照受孕时体重将母鼠分为空白对照组和低、中和高剂量组，从妊娠(GD)第6天至产后(PND)第21天分别给予正常和4-壬基酚拌饲量依次为10、100和500 mg/kg的NIH-31改良饲料。PND21后，将母鼠随机分为两部分：一部分进行空斑实验和血清凝血素测定；另一部分进行NK细胞活性测定和脾淋巴细胞转化试验，并测定血清细胞因子含量。此外，每组随机抽取3只母鼠测量外周血和脾淋巴细胞亚群以及脾中叉头状转录因子3(Foxp3)和孤独核受体γt(RORγt)mRNA表达量、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子5(p-STAT5)和磷酸化酪氨酸激酶3(p-JAK3)的蛋白水平。结果 与空白组相比，高剂量组GD21和GD22母鼠体重明显降低(P<0.01),高剂量组PND4、PND7、PND11体重明显低于空白组(P<0.05);胸腺和脾高剂量组脏器系数明显低于空白组(P<0.05);高剂量组血清凝集程度和空斑数明显低于空白组(P<0.05),同时3个剂量组的NK细胞活性均明显降低(P<0.05);外周血中高剂量组B细胞占白细胞的比例高于空白组(P<0.05),外周血和脾中、高剂量组辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比值均明显高于空白组(P<0.01);与空白组相比，高剂量组血清转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-17A(IL-17A)含量及3个剂量组血清白细胞介素-10(IL-10)含量、TGF-β/IL-17A比值均明显降低(P<0.05);各剂量组脾Foxp3/RORγt mRNA比值均低于空白组(P<0.05);低和中剂量组脾p-STAT3、p-STAT5及高剂量组p-JAK3蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 围生期低剂量4-壬基酚暴露对亲代雌性大鼠具有一定的免疫毒性，其可能机制与4-NP可通过激活JAK-STAT信号通路，导致p-STAT3和p-STAT5持续激活，诱导RORγt表达，促进Th17细胞分化和IL-17的释放，使Th17/Treg平衡左移有关。
2022年01期 v.36 43-48+54页 [查看摘要][在线阅读][下载 1398K] - 刘小凡;余春红;巩萌;张宇婧;韩畅;易宗春;
目的 观察经苯代谢物长期处理的K562细胞在撤出苯代谢物后，继续传代培养时的红系分化能力的变化规律。方法 K562细胞分别以5μmol/L 1,2,4-苯三醇和10μmol/L氢醌处理4周，每周以联苯胺染色法检测受处理细胞Hemin诱导的红系分化率，评价红系分化能力；处理满4周后，撤出苯代谢物，一部分细胞继续传代培养，持续12周，每2周测定细胞的红系分化能力，另一部分细胞进行单细胞克隆培养，选取红系分化能力较低的细胞株连续传代培养，每2周测定各细胞株红系分化能力。结果 在处理的前3周，苯三醇组和氢醌组K562细胞红系分化能力出现时间依赖性下降，而在处理3和4周后，苯三醇组红系分化率均分别只有对照组的51.1%和50.1%,氢醌组均只有对照组的33.1%和31.4%。4周处理后，洗去苯代谢物，在继续传代培养的前6周，苯三醇组和氢醌组红系分化率均分别稳定地维持在22.3%～23.9%和14.0%～15.6%范围内，此后逐渐回升，但仍然明显低于对照组。经苯代谢物处理4周后再经4周的单细胞克隆培养，获得单细胞起源克隆细胞株，各组来源的细胞克隆的红系分化率分别为：对照组39.1%～49.7%,平均45.7%;苯三醇组4.1%～45.3%,平均20.6%;氢醌组0.8%～28.9%,平均12.7%。如将红系分化率≤10%的单克隆细胞株进行第1轮继续传代培养2周，苯三醇组和氢醌组来源细胞株的平均红系分化率仅有小幅回升。如每处理组每批次各挑选出3个红系分化能力最低的单克隆细胞株，再进行第2轮继续传代培养2周，则单克隆细胞株在刚克隆出来时、第1次和第2次继续传代培养后的平均红系分化率，在苯三醇组来源细胞株中分别为7.5%、8.4%和16.3%,在氢醌组来源细胞株中分别为2.3%、3.4%和7.5%。从每处理组的每批次克隆细胞株中选取红系分化能力最低的细胞株，进行4轮连续传代培养，经最初4周的单细胞克隆培养后、第1次、第2次、第3次和第4次2周继续传代培养后的平均平均红系分化率，在来自苯三醇组的细胞株中分别为6.4%、7.6%、12.8%、16.5%和19.4%,在来自氢醌组的细胞株中分别为1.5%、1.7%、4.9%、7.7%、11.5%。结论 苯代谢物长期处理造成K562细胞红系分化能力下降后，即使没有苯代谢物存在，这种红系分化能力的低下可维持相当长的时间；苯代谢物处理的K562细胞群体中几乎所有单个细胞红系分化能力的下降，只是每个细胞红系分化能力的下降程度有所不同。
2022年01期 v.36 49-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 919K] - 刘小凡;余春红;巩萌;张宇婧;韩畅;易宗春;
目的 观察经苯代谢物长期处理的K562细胞在撤出苯代谢物后，继续传代培养时的红系分化能力的变化规律。方法 K562细胞分别以5μmol/L 1,2,4-苯三醇和10μmol/L氢醌处理4周，每周以联苯胺染色法检测受处理细胞Hemin诱导的红系分化率，评价红系分化能力；处理满4周后，撤出苯代谢物，一部分细胞继续传代培养，持续12周，每2周测定细胞的红系分化能力，另一部分细胞进行单细胞克隆培养，选取红系分化能力较低的细胞株连续传代培养，每2周测定各细胞株红系分化能力。结果 在处理的前3周，苯三醇组和氢醌组K562细胞红系分化能力出现时间依赖性下降，而在处理3和4周后，苯三醇组红系分化率均分别只有对照组的51.1%和50.1%,氢醌组均只有对照组的33.1%和31.4%。4周处理后，洗去苯代谢物，在继续传代培养的前6周，苯三醇组和氢醌组红系分化率均分别稳定地维持在22.3%～23.9%和14.0%～15.6%范围内，此后逐渐回升，但仍然明显低于对照组。经苯代谢物处理4周后再经4周的单细胞克隆培养，获得单细胞起源克隆细胞株，各组来源的细胞克隆的红系分化率分别为：对照组39.1%～49.7%,平均45.7%;苯三醇组4.1%～45.3%,平均20.6%;氢醌组0.8%～28.9%,平均12.7%。如将红系分化率≤10%的单克隆细胞株进行第1轮继续传代培养2周，苯三醇组和氢醌组来源细胞株的平均红系分化率仅有小幅回升。如每处理组每批次各挑选出3个红系分化能力最低的单克隆细胞株，再进行第2轮继续传代培养2周，则单克隆细胞株在刚克隆出来时、第1次和第2次继续传代培养后的平均红系分化率，在苯三醇组来源细胞株中分别为7.5%、8.4%和16.3%,在氢醌组来源细胞株中分别为2.3%、3.4%和7.5%。从每处理组的每批次克隆细胞株中选取红系分化能力最低的细胞株，进行4轮连续传代培养，经最初4周的单细胞克隆培养后、第1次、第2次、第3次和第4次2周继续传代培养后的平均平均红系分化率，在来自苯三醇组的细胞株中分别为6.4%、7.6%、12.8%、16.5%和19.4%,在来自氢醌组的细胞株中分别为1.5%、1.7%、4.9%、7.7%、11.5%。结论 苯代谢物长期处理造成K562细胞红系分化能力下降后，即使没有苯代谢物存在，这种红系分化能力的低下可维持相当长的时间；苯代谢物处理的K562细胞群体中几乎所有单个细胞红系分化能力的下降，只是每个细胞红系分化能力的下降程度有所不同。
2022年01期 v.36 49-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 919K] - 郭晶晶;葛仁山;吴安石;
目的 探究乳化异氟醚对小鼠睾丸间质细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法 将小鼠睾丸间质细胞TM3分为对照组、低剂量乳化异氟醚组、中剂量乳化异氟醚组和高剂量乳化异氟醚组。对照组加入30%脂肪乳，低、中和高剂量乳化异氟醚组分别采用终浓度0.5、1和2 mmol/L乳化异氟醚进行处理。采用MTT法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测Bax/Bcl-2、p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K的表达，酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞睾酮分泌情况，比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平。结果 与对照组相比，低、中和高剂量乳化异氟醚组小鼠睾丸间质细胞的细胞活力、睾酮分泌量、SOD与CAT水平均明显降低(P<0.05),细胞凋亡率，Bax/Bcl-2、p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K表达水平，MDA水平均明显增加(P<0.05)。PI3K抑制剂LY294002可逆转乳化异氟醚对小鼠睾丸间质细胞的细胞活力，凋亡率，Bax/Bcl-2、p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K表达水平，睾酮分泌量和SOD、CAT、MDA水平的影响(P<0.05)。结论 乳化异氟醚通过激活PI3K/AKT信号通路引发小鼠睾丸间质细胞损伤。
2022年01期 v.36 55-59+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 2037K] - 郭晶晶;葛仁山;吴安石;
目的 探究乳化异氟醚对小鼠睾丸间质细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法 将小鼠睾丸间质细胞TM3分为对照组、低剂量乳化异氟醚组、中剂量乳化异氟醚组和高剂量乳化异氟醚组。对照组加入30%脂肪乳，低、中和高剂量乳化异氟醚组分别采用终浓度0.5、1和2 mmol/L乳化异氟醚进行处理。采用MTT法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测Bax/Bcl-2、p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K的表达，酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞睾酮分泌情况，比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平。结果 与对照组相比，低、中和高剂量乳化异氟醚组小鼠睾丸间质细胞的细胞活力、睾酮分泌量、SOD与CAT水平均明显降低(P<0.05),细胞凋亡率，Bax/Bcl-2、p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K表达水平，MDA水平均明显增加(P<0.05)。PI3K抑制剂LY294002可逆转乳化异氟醚对小鼠睾丸间质细胞的细胞活力，凋亡率，Bax/Bcl-2、p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K表达水平，睾酮分泌量和SOD、CAT、MDA水平的影响(P<0.05)。结论 乳化异氟醚通过激活PI3K/AKT信号通路引发小鼠睾丸间质细胞损伤。
2022年01期 v.36 55-59+64页 [查看摘要][在线阅读][下载 2037K] - 李晓红;欧阳钏;柯鸿阳;单慧;于丽;谭金峰;徐东群;李万伟;
目的 探讨PM_(2.5)诱导的心肌损伤及硒的保护作用。方法 健康清洁级雄性SD大鼠32只，随机分为4组，对照组、PM_(2.5)组、硒组及硒+PM_(2.5)组。分别灌胃给予生理盐水1 ml,或亚硒酸钠溶液35μg/kg·bw后，利用定量雾化器给予1.5 ml生理盐水或140.16μg/ml PM_(2.5)悬液，连续30 d,禁食过夜后，麻醉取血及心脏组织，利用相关试剂盒检测相应指标。结果 大鼠暴露PM_(2.5)后，体重增加值较对照组少，硒预处理有所改善；大鼠暴露PM_(2.5),其心肌组织中谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平较对照组明显降低(P<0.05),丙二醛(MDA)水平较对照组明显增加(P<0.05),硒预处理后，GSH-Px水平较PM_(2.5)组明显升高(P<0.05),MDA水平较PM_(2.5)组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05);PM_(2.5)可使大鼠心肌组织中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活力水平明显升高(P<0.05),硒预处理可明显降低NO含量及NOS活力水平(P<0.05);PM_(2.5)染毒组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)及心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平明显升高(P<0.05),硒预处理可明显降低这些指标的水平，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大鼠暴露一定剂量PM_(2.5)可导致心脏受损，一定剂量硒的干预可在一定程度上起到缓解作用。
2022年01期 v.36 60-64页 [查看摘要][在线阅读][下载 907K] - 李晓红;欧阳钏;柯鸿阳;单慧;于丽;谭金峰;徐东群;李万伟;
目的 探讨PM_(2.5)诱导的心肌损伤及硒的保护作用。方法 健康清洁级雄性SD大鼠32只，随机分为4组，对照组、PM_(2.5)组、硒组及硒+PM_(2.5)组。分别灌胃给予生理盐水1 ml,或亚硒酸钠溶液35μg/kg·bw后，利用定量雾化器给予1.5 ml生理盐水或140.16μg/ml PM_(2.5)悬液，连续30 d,禁食过夜后，麻醉取血及心脏组织，利用相关试剂盒检测相应指标。结果 大鼠暴露PM_(2.5)后，体重增加值较对照组少，硒预处理有所改善；大鼠暴露PM_(2.5),其心肌组织中谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平较对照组明显降低(P<0.05),丙二醛(MDA)水平较对照组明显增加(P<0.05),硒预处理后，GSH-Px水平较PM_(2.5)组明显升高(P<0.05),MDA水平较PM_(2.5)组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05);PM_(2.5)可使大鼠心肌组织中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活力水平明显升高(P<0.05),硒预处理可明显降低NO含量及NOS活力水平(P<0.05);PM_(2.5)染毒组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)及心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平明显升高(P<0.05),硒预处理可明显降低这些指标的水平，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大鼠暴露一定剂量PM_(2.5)可导致心脏受损，一定剂量硒的干预可在一定程度上起到缓解作用。
2022年01期 v.36 60-64页 [查看摘要][在线阅读][下载 907K] - 巨佳;肖晓辉;徐争;
目的 研究白露汤含药血清联合吉非替尼对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法 人肺癌A549细胞分成对照组、吉非替尼、低剂量药物血清+吉非替尼、中剂量药物血清+吉非替尼和高剂量药物血清+吉非替尼组，CCK-8实验检测细胞增殖，膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)双染法测定细胞凋亡，PI单染法测定细胞周期，Western blot方法测定细胞核增殖抗原(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein, Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl2)蛋白表达。结果 与对照组比较，吉非替尼、低剂量药物血清+吉非替尼、中剂量药物血清+吉非替尼和高剂量药物血清+吉非替尼组细胞增殖活性降低，凋亡率和G_0/G_1期比例升高，Ki67、PCNA和Bcl-2蛋白表达减少，Bax蛋白表达增多，差异有统计学意义(P<0.05);与吉非替尼组比较，低剂量药物血清+吉非替尼、中剂量药物血清+吉非替尼、高剂量药物血清+吉非替尼组细胞增殖活性降低，凋亡率和G_0/G_1期比例升高，Ki67、PCNA、Bcl-2蛋白表达减少，Bax蛋白表达增多，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 白露汤含药血清联合吉非替尼能够抑制人肺癌A549细胞增殖并促进细胞凋亡。
2022年01期 v.36 65-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 1531K] - 巨佳;肖晓辉;徐争;
目的 研究白露汤含药血清联合吉非替尼对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法 人肺癌A549细胞分成对照组、吉非替尼、低剂量药物血清+吉非替尼、中剂量药物血清+吉非替尼和高剂量药物血清+吉非替尼组，CCK-8实验检测细胞增殖，膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)双染法测定细胞凋亡，PI单染法测定细胞周期，Western blot方法测定细胞核增殖抗原(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein, Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl2)蛋白表达。结果 与对照组比较，吉非替尼、低剂量药物血清+吉非替尼、中剂量药物血清+吉非替尼和高剂量药物血清+吉非替尼组细胞增殖活性降低，凋亡率和G_0/G_1期比例升高，Ki67、PCNA和Bcl-2蛋白表达减少，Bax蛋白表达增多，差异有统计学意义(P<0.05);与吉非替尼组比较，低剂量药物血清+吉非替尼、中剂量药物血清+吉非替尼、高剂量药物血清+吉非替尼组细胞增殖活性降低，凋亡率和G_0/G_1期比例升高，Ki67、PCNA、Bcl-2蛋白表达减少，Bax蛋白表达增多，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 白露汤含药血清联合吉非替尼能够抑制人肺癌A549细胞增殖并促进细胞凋亡。
2022年01期 v.36 65-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 1531K] - 邓洁;叶子豪;马燕凌;
目的 探讨芦比替定(lurbinectedin, Lurb)通过环状RNA CCS(circCCS)靶向微小RNA 1827(microRNA-1827,miR-1827)抑制非小细胞肺癌H522细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的机制。方法 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测非小细胞肺癌组织及H522细胞中circCCS、miR-1827的表达。RIP及双荧光素酶实验验证circCCS和miR-1827的靶向关系。H522细胞分成对照组、Lurb组、Lurb+载体组、Lurb+circCCS组、Lurb+circCCS+miR-NC组和Lurb+circCCS+miR-1827组，噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)实验检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中上皮型钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 与癌旁组织比较，非小细胞肺癌组织中circCCS表达增多，miR-1827表达减少(P<0.05)。与肺正常上皮细胞BEAS-2B比较，H522细胞中circCCS表达增多，miR-1827表达减少差异有统计学意义(P<0.05)。CircCCS和miR-1827具有靶向关系。与对照组比较，Lurb组H522细胞中circCCS表达水平、细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低，miR-1827表达水平、细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Lurb+载体组比较，Lurb+circCCS组H522细胞中细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低，细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Lurb+circCCS+miR-NC组比较，Lurb+circCCS+miR-1827组H522细胞中细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低，细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Lurb通过circCCS促进miR-1827的表达抑制H522细胞EMT并诱导细胞凋亡。
2022年01期 v.36 70-75+95页 [查看摘要][在线阅读][下载 3084K] - 邓洁;叶子豪;马燕凌;
目的 探讨芦比替定(lurbinectedin, Lurb)通过环状RNA CCS(circCCS)靶向微小RNA 1827(microRNA-1827,miR-1827)抑制非小细胞肺癌H522细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的机制。方法 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测非小细胞肺癌组织及H522细胞中circCCS、miR-1827的表达。RIP及双荧光素酶实验验证circCCS和miR-1827的靶向关系。H522细胞分成对照组、Lurb组、Lurb+载体组、Lurb+circCCS组、Lurb+circCCS+miR-NC组和Lurb+circCCS+miR-1827组，噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)实验检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中上皮型钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 与癌旁组织比较，非小细胞肺癌组织中circCCS表达增多，miR-1827表达减少(P<0.05)。与肺正常上皮细胞BEAS-2B比较，H522细胞中circCCS表达增多，miR-1827表达减少差异有统计学意义(P<0.05)。CircCCS和miR-1827具有靶向关系。与对照组比较，Lurb组H522细胞中circCCS表达水平、细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低，miR-1827表达水平、细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Lurb+载体组比较，Lurb+circCCS组H522细胞中细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低，细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Lurb+circCCS+miR-NC组比较，Lurb+circCCS+miR-1827组H522细胞中细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低，细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Lurb通过circCCS促进miR-1827的表达抑制H522细胞EMT并诱导细胞凋亡。
2022年01期 v.36 70-75+95页 [查看摘要][在线阅读][下载 3084K]